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物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态,代做网申这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分能量又以光的形式放出,从而产生荧光。不同物质由于分子结构的不同,其激发念能级的分布具有各自不同的特征,这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发光谱和发射光谱。因此,可以用荧光激发光谱和发射光谱的不同定性地鉴定物质。
荧光分析法在药物与蛋白质相互作用分析方面的应用是基于在一定条件下,药物等小分子与蛋白质等生物大分子发生相互作用,从而使得蛋白质内源性的荧光发生了猝灭。通过分析加入药物作用前后血清白蛋白在发射波长处荧光强度值的变化和峰位及峰形的变化可获得两者相互作用的信息。
在分析方法中,荧光分析法快速、灵敏、准确、选择性强的特点使其发展迅速,应用日益广泛。网申代做通过所测得的荧光强度来测定样品中荧光物质的含量,而影响荧光强度的因素有检测器的灵敏度,激发光的波长和强度,荧光物质的自身特性以及荧光物质的浓度。因此,如果想增大荧光强度,改善分析的灵敏度,可以通过加大激发光强度来实现。而对于一些特别的物质,如光敏物质时,不能轻易增大激发光强度,因为如果激发光强度过分加大了,就会使试样溶液中的荧光物质光解作用显著。
目前,随电子科学技术的的迅猛发展,微弱光信号的检测灵敏度在很大程度上已得到改善,pmol/L 已是荧光分析法所能测得的灵敏度,荧光分析法的灵敏度不仅远高于吸光光度法,更高于比色法。
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